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南京建成細(xì)胞凋亡整體解決方案

發(fā)布時(shí)間：2013/11/15 17:15:49　瀏覽次數(shù)：23927　[字號(hào)：大中小]　 [關(guān)閉此頁　打印此頁]

一、TUNEL法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè)，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3'-OH形成，很少能夠被染色。TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法，對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色，能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測(cè)定，并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞，因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G001-1	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	20T	盒	顯色法通用型	1800
G001-1	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	50T	盒	顯色法通用型	2800
G001-2	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	20T	盒	顯色法石蠟切片	1800
G001-2	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	50T	盒	顯色法石蠟切片	2800
G001-3	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	20T	盒	顯色法冰凍切片	1800
G001-3	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	50T	盒	顯色法冰凍切片	2800
G001-4	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	20T	盒	顯色法細(xì)胞樣本	1800
G001-4	TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒	50T	盒	顯色法細(xì)胞樣本	2800

二、磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）

磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力特異性結(jié)合。將Annexin-V進(jìn)行熒光素（FITC、PE）或biotin標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G002-1	Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	20T	盒	Annexin V法	600元
G002-1	Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	50T	盒	Annexin V法	980元
G002-2	Annexin V-EGFP細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	20T	盒	Annexin V法	600元
G002-2	Annexin V-EGFP細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	50T	盒	Annexin V法	980元
G002-3	細(xì)胞凋亡PI檢測(cè)試劑盒	100T	盒	Annexin V法	980元

三、線粒體膜勢(shì)能的檢測(cè)

線粒體在細(xì)胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細(xì)胞凋亡刺激因子均可誘導(dǎo)不同的細(xì)胞發(fā)生凋亡，而線粒體跨膜電位的下降，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程中最早發(fā)生的事件，它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂）出現(xiàn)之前，一旦線粒體膜電勢(shì)能（DYmt）崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G003	線粒體提取試劑盒	50T	盒	/	800
G004	線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒	10T	盒	JC-1法	680
G004	線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒	20T	盒	JC-1法	980

四、DNA片斷化檢測(cè)

細(xì)胞凋亡時(shí)主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長(zhǎng)的DNA大片段, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜（DNA ladder）。細(xì)胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純DNA，進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少，還可在分離提純DNA后，用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）使DNA標(biāo)記，然后進(jìn)行電泳和放射自顯影，觀察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G005	DNA損傷試劑盒	20T	盒	彗星電泳法	580元
G006	DNA Ladder檢測(cè)試劑盒	20T	盒	/	380元

五、Caspase家族活性的檢測(cè)

Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，它在凋亡信號(hào)傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段，它被激活，活化的Caspase-3由兩個(gè)大亞基（17KD）和兩個(gè)小亞基（12KD）組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。但在細(xì)胞凋亡的晚期和死亡細(xì)胞，caspase-3的活性明顯下降。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G007	caspase-3活性檢測(cè)試劑盒	20T	盒	分光光度法	800元
		50T	盒		1500元
		100T	盒		2600元
G008	caspase-8活性檢測(cè)試劑盒	20T	盒	分光光度法	800元
		50T	盒		1500元
		100T	盒		2600元
G009	caspase-9活性檢測(cè)試劑盒	20T	盒	分光光度法	800元
		50T	盒		1500元
		100T	盒		2600元

六、細(xì)胞周期檢測(cè)

細(xì)胞壞死和凋亡是兩種截然不同的細(xì)胞學(xué)現(xiàn)象，二者發(fā)生的過程在形態(tài)學(xué)上有很大的區(qū)別。在細(xì)胞壞死時(shí)，細(xì)胞膜發(fā)生滲漏，細(xì)胞內(nèi)容物包括細(xì)胞器以及染色質(zhì)釋放到胞外。而在細(xì)胞凋亡過程，起始階段，染色質(zhì)固縮、分離并沿核膜分布，細(xì)胞質(zhì)亦發(fā)生固縮，但細(xì)胞膜依然完整未失去選擇透性；在凋亡后期，核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片斷，與某些細(xì)胞器如線粒體一起聚集，為反折的細(xì)胞膜所包圍，以后逐漸分離，形成凋亡小體。

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位	檢測(cè)方法	售價(jià)
G010	細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒	50T	盒	微板比色法	800元
G010	細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒	100T	盒	微板比色法	1200元
G011	MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒	500T	盒	微板比色法	200元
G011	MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒	1000T	盒	微板比色法	350元
G12	CCK-8細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒	100T	盒	微板比色法	200元
		500T	盒		600元
		1000T	盒		980元

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