培養(yǎng)細(xì)胞測(cè)定ATP含量樣本前處理？
發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 10:14:50 瀏覽次數(shù)：4810 [字號(hào)：大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
我購(gòu)買(mǎi)了你們的A095ATP含量測(cè)試盒，做的對(duì)象是培養(yǎng)細(xì)胞。說(shuō)明書(shū)上關(guān)于細(xì)胞勻漿破碎的實(shí)驗(yàn)步驟我剛剛咨詢你們的技術(shù)，技術(shù)簡(jiǎn)單跟我說(shuō)了幾種方法：超聲裂解，勻漿碾磨等，還告訴我不要用細(xì)胞裂解液。能否將勻漿破碎的具體操作步驟，用到的儀器等詳細(xì)說(shuō)明發(fā)給我。麻煩了，謝謝！
回復(fù)：
1. 先進(jìn)行細(xì)胞常規(guī)消化,離心.上層的細(xì)胞培養(yǎng)液若不測(cè)任何指標(biāo)可以棄去.或者用小離心管冷凍保存,以備以后測(cè)指標(biāo)用.
2. 離心后的(3500轉(zhuǎn)/分左右)細(xì)胞沉淀于離心管底部,然后加生理鹽水或0.01M/L,PH=7.4的PBS作為勻漿介質(zhì)（一般情況下，將細(xì)胞稀釋至10的6次方或10的7次方）進(jìn)行超聲勻漿或貼壁式勻漿器進(jìn)行勻漿，千萬(wàn)不可以用SDS破壁（若用之將嚴(yán)重影響酶的活性）。若老師采用貼壁式勻漿器進(jìn)行勻漿，可從銷售部訂購(gòu)玻璃貼壁式勻漿器。
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