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ATP含量測定的一些問題？

發布時間：2014/2/8 10:06:21　瀏覽次數：4587　[字號：大 中 小]　 [關閉此頁　打印此頁]

每次測量都是用新的EP管，漩渦混勻器充分混勻。用分光光度計測量。比色皿都是經過4遍純水沖洗。有5個問題還請幫我回答一下：

1.由于我們沒有0.5cm光徑的比色皿，所以在加入終止劑后又用蒸餾水對原液進行了4稀釋（吸光度就在1以下了）。這樣可以嗎？

2.你們有沒有出現過測定管值小于對照管的現象。

3.體系中加入終止劑后，經過稀釋為什么有的體系中會出現懸浮物？這是怎么回事？

4.顯色應用液的配制：顯色劑甲液是7ml/瓶，顯色劑乙液是6ml/瓶。用時將兩液混勻即可。如果這樣做的話那么總液量是不是就有13ml了？我一次實驗用不了這么多的顯色液，比如只用6.5ml。是不是就取甲液3.5ml、乙液3ml呢？

5.這是試劑盒是不是你們最新推出的產品。穩定嗎？

回復：

1、最終顯色液我們一般不考慮稀釋，雖然理論上都是水相，但是本身ATP含量就比較低，再稀釋更容易出現測定不出的情況。

2、查批量檢測記錄有個別樣本中ATP表達很低的情況下，會出現測定管等于或略小于對照管的現象。

3、反應體系，加終止劑后，沉淀蛋白終止反應，所以體系會出現絮狀物，混勻成渾濁，離心后有沉淀，上清澄清透亮。

4、顯色劑甲乙液，可以根據需要量吸出后配制，當然如果一次性配完后，5天內使用沒有問題。

5、ATP含量試劑盒推出不久，由于樣本中表達不高，顯色劑靈敏度很高，出現誤差也是可能的

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