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魚體肝臟勻漿做一些指標(biāo)的取樣濃度？

發(fā)布時間：2014/2/8 9:00:59　瀏覽次數(shù)：5854　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁　打印此頁]

之前我們用貴所的蛋白質(zhì)，總SOD、CAT、MDA、試劑盒測定過程當(dāng)中都有一個最佳取樣量摸索的問題，現(xiàn)在我們試圖增加新指標(biāo)，分別是羥自由基，GSH、GSH-PX、GSH-ST、GR的試劑盒，在閱讀完說明書我們發(fā)現(xiàn)其中有幾樣指標(biāo)并沒有給出最佳取樣量的說明，有羥自由基，GR、GSH-ST、GSH。因為我們做的是魚體肝臟勻漿，并不是通常測定的小鼠肝臟勻漿，在勻漿濃度上我們可能還需要更多的參考，請問有什么意見可以給我在各個指標(biāo)測定中勻漿濃度有更多的參考依據(jù)。

另外樣品測定過程中不可避免的會遇到樣品保存的問題，勻漿完保存樣品在測定上會不會有較大的影響呢，因為樣本是魚體肝臟，不像老鼠肝臟會比較大塊，我們不能保存肝臟樣，會將其勻漿后保存

另外在自由基測定上，試劑二應(yīng)用液配制針對抑制和產(chǎn)生自由基有不同的配法，我對備注中給出的對組織樣品會抑制自由基有點(diǎn)疑惑，是否可以麻煩解答。

回復(fù)：

1、從肝勻漿的測定記錄來看，GR、GSH、GSH-ST一般都是直接用10%勻漿進(jìn)行測定。但是羥自由基試劑盒，都需要做預(yù)實(shí)驗（隨貨說明書上有附錄，專門關(guān)于預(yù)實(shí)驗的操作詳細(xì)流程）

2、關(guān)于樣本的保存，一般我們都是建議直接保存組織，一旦制備勻漿以后相關(guān)指標(biāo)的穩(wěn)定性都不好！像老師的指標(biāo)，羥自由基、GR最好是要當(dāng)天完成，GSH-ST和GSH可以第二天完成（4℃密封保存）

3、羥自由基測定，我們試劑盒主要檢測的是抑制羥自由基的能力和產(chǎn)生羥自由基能力，動物實(shí)驗（血清、組織）包括細(xì)胞試驗，一般都是表達(dá)出抑制羥自由基為主。如果老師測定肝組織的話，試劑二肯定是按照抑制羥自由基的來配制的！

NOS中比色 怎么算？能用酶標(biāo)儀？

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