菌體蛋白酶的測(cè)定用什么試劑盒？對(duì)菌體樣本有什么要求？
發(fā)布時(shí)間：2014/2/7 16:55:48 瀏覽次數(shù)：4244 [字號(hào)：大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
我現(xiàn)在做的實(shí)驗(yàn)是關(guān)于菌體蛋白酶的，現(xiàn)在還不確定其中的蛋白酶是酸性的、堿性的還是中性的，用普通的酶活測(cè)定方法測(cè)出的吸光值很小，有時(shí)候還是負(fù)的。
貴公司有沒(méi)有什么樣的試劑盒能方便地測(cè)出其中蛋白酶的含量？
希望您能給我點(diǎn)意見(jiàn)或向我推薦一些適合我的公司的產(chǎn)品。
謝謝！
回復(fù)：推薦老師用我們公司的A080-1胃蛋白酶測(cè)試盒，具體的原理為胃蛋白酶可水解蛋白產(chǎn)生含酚的氨基酸，而酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍(lán)色物質(zhì)，通過(guò)比色可測(cè)定胃蛋白酶活力。
胃蛋白酶的底物液為蛋白質(zhì)，理論上來(lái)說(shuō)不同的蛋白酶在最適PH條件下都具體催化底物液（蛋白質(zhì)）的能力，由于老師不太清楚其菌體的蛋白酶最適PH（一般我們做菌體測(cè)定都是選擇中性條件的緩沖液），因此需用不同的PH條件的緩沖液提取菌體的蛋白酶，進(jìn)行測(cè)定，最終選擇最適PH進(jìn)行提取用于批量實(shí)驗(yàn)。
由于菌體的活性測(cè)定值本來(lái)就很低，一般我們要求收集的菌體數(shù)量在106以上（推薦5×106），統(tǒng)一加0.5ml的緩沖液進(jìn)行提取。
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